Oulun yliopiston Lastenneurologian tutkimusyksikkö tutkii ihmispotilailla tavattua harvinaista, vakavaa, aiemmin tuntematonta monielintautia. NHL repeat containing 2 (NHLRC2)-geenin mutaatiot aiheuttavat FINCA-tautia, johon kuuluu mm. krooninen hemolyyttinen anemia. Taudin, geenivirheiden ja NHLRC2-proteiinin tutkimiseksi in vivo on luotu hiirimalli. Hiirimallia on geenimuunneltu siten, että se ilmentää ihmissairauden aiheuttaneita mutaatioita. Toukokuussa 2018 julkaistussa artikkelissa eriteltiin FINCA:n aiheuttamat muutokset punasoluihin ja veren proteiineihin.

FINCA-hiirimallin punasolututkielma on osa Lastenneurologian tutkimusyksikön FINCA-taudin tutkimuskokonaisuutta. Opinnäytetyön tavoitteena on luotettavasti mitata tutkimusryhmälle villityypin ja mutantin hiiren verenkuvista FINCA-mutaation aiheuttama säännönmukainen ero eli FINCA-taudin ilmeneminen myös hiirten veressä. Ero hiiriryhmien välillä on edellytys hiirimallin veren jatkotutkimuksille. Opinnäytetyön tarkoitus on tuottaa luotettava määrällinen poikkileikkausaineisto tutkimusryhmälle tilastoanalyysia varten, jolla voidaan sulkea pois tai vahvistaa ero verenkuvissa.

Opinnäytetyössä käytetyt laboratoriomenetelmät perustuvat eläinmalleja käsittelevän kirjallisuuteen ja FINCA-tutkimuksen osoittamiin muutoksiin ihmispotilaiden veressä. Ydinmenetelmiä mittauksessa ovat hemoglobiinin määritys spektrofotometrialla, hematokriitin sentrifugointi kapillaarissa, solulaskenta mikroskoopilla Neubauer-kammiossa, sivelyvalmisteet, värjäystekniikat, retikulosyyttilaskenta ja punasolumorfologian tarkastelu mikroskoopilla. Punasoluindeksit lasketaan mitatuista arvoista. Jäännösnäyte sentrifugoidaan ja eritellään pakastettavaksi plasmaksi. Sivelyvalmisteet kiinnitetään ja suojataan päällyslasilla säilyvyyden takaamiseksi. Pernan suhteellinen paino sisällytetään tutkimustuloksiin herkkänä hiiren hemolyysin ja punasoluregeneraation mittarina.

Opinnäytetyön tulos on taulukoitu mittausaineisto N=23 (12:11 FINCA-ryhmä suhteessa kontrolliryhmään) hiiriyksilön veren hemoglobiinista, veren punasoluarvoista ja morfologiasta. Mittausten yhteydessä valmistetaan tutkimusryhmälle pakastetut plasmanäytteet, supravitaalivärjätyt retikulosyytti-, May-Grünwald-Giemsa-värjätyt- ja värjäämättömät sivelyvalmisteet. Lisäksi tuotetaan digitaalisia fotomikrografeja 1000X-suurennoksella punasoluista ja tutkimuspäiväkirja yksityiskohtaisilla menetelmäohjeilla.

FINCA-tutkimuksella on eettisten lautakuntien hyväksynnät. Kokeen hiirten perimä, ikä ja elinympäristö oli vakioitu. Mittausmenetelmissä näytteensisäisillä vertailuilla varmistuttiin tulosten yhdenmukaisuudesta. Menetelmien jatkuvuus oli hyvä ja tulostaso säilyi samana kaksi kuukautta kestäneiden mittausten ajan. Määrälliset tulokset taulukoitiin yksiselitteisyyden ja vertailun helpottamiseksi.